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转染技术大致分为三类:化学、物理和生物。没有一种转染方法可以适用于所有类型的细胞和实验。

因此,理想的转染方法应根据细胞类型和实验需求进行选择。具体来说,将分子传递到细胞中的能力因有效载荷大小和细胞类型而异。例如,原代细胞和干细胞通常比更常见的细胞系更难转染。此外,所使用的转染方法应具有高效率、低毒性,对正常细胞生理影响最小,同时易于使用和可重复。

在具体操作中,需要探索转染方法,并选择最适合您的细胞和实验应用的方法。

对比项目阳离子脂质体转染电转染病毒递送
转染效率(容易转染的细胞系,如HEK293和常规肿瘤细胞等)
+++++++++
转染效率(难转染的细胞系,如原代细胞和神经细胞等)++

+++

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转染后细胞存活数量++
++++
转染基因的大小
++
+++++
高通量操作的便利性+++
++++
使用的便利性+++
+++
安全性
++++++
+
价格+++
+++

表1 不同转染方式的比较


化学转染的几种方式

化学转染的原理
fbioe-09-701031-g001
图1 化学转染的原理[1] 
转染试剂与外源核酸形成阳离子聚合物,胞吞到细胞,最终转录成蛋白
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参考文献
[1] Fus-Kujawa A, Prus P, Bajdak-Rusinek K, Teper P, Gawron K, Kowalczuk A, Sieron AL.An Overview of Methods and Tools for Transfection of Eukaryotic Cells in vitro[J].Front Bioeng Biotechnol. 2021 , 9:701031.
阳离子聚合物的转染效率可能各不相同,它们通过形成核酸-聚合物复合物起作用。这些复合物可以粘附在细胞膜上,通过内吞作用进入细胞。
03
阳离子聚合物转染
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02
磷酸钙转染
阳离子脂质转染是最常用的方法之一,可在各种应用和细胞类型中完成转染。此外,该方法用途广泛,可用于递送DNA、RNA或蛋白质。其原理为核酸与阳离子脂质试剂形成复合物,通过内吞作用进入细胞。
01
阳离子脂质体转染